胎牛血清常见问题及处理方法
2025-11-28 来源:网络
一、储存与解冻规范
1.长期储存条件
未拆封血清应存放于-20℃(短期可-80℃),避免反复冻融。
分装时预留10%体积空间(冻融后体积膨胀)。
2.解冻方法
程序性解冻:从-20℃移至4℃冰箱过夜,再室温摇匀至溶解。
禁忌:禁止直接37℃水浴或高温解冻(易致蛋白变性沉淀)。
二、沉淀问题与处理
1.沉淀成分
主要为纤维蛋白、脂蛋白、磷酸钙等,属正常现象。
巨噬细胞培养时需注意沉淀可能影响结果。
2.处理方法
离心法:400-1000×g离心5-10分钟,取上清使用。
避免过滤:可能堵塞滤膜或损失营养成分。
三、其他关键注意事项
1.热灭活
非必要步骤,56℃/30分钟灭活会显著增加沉淀。
2.短期保存
4℃存放不超过1个月,长期需分装冷冻。
3.污染判断
磷酸钙沉淀易误认为微生物污染(显微镜下可见布朗运动)。
注:具体操作需结合产品说明书,不同品牌血清可能存在差异。