PCR的基本原理与DNA的体内复制相类似，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性、退火和延伸三个基本反应步骤构成：
①模板DNA的变性：
模板DNA经高温（95℃左右）加热一定时间后，使其解离成单链，以便它与引物结合；
②模板DNA与引物的退火（复性）：
将温度降至55℃左右时，引物与模板DNA单链按碱基互补配对的原则结合；
③引物的延伸：
再将温度调至72℃左右（DNA聚合酶最适反应温度），DNA模板和引物结合物在Taq DNA聚合酶的作用下，按碱基配对与半保留复制原理，沿着磷酸到五碳糖（5'→3'）的方向合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链。这样经变性、退火和延伸重复若干个循环后，就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。
PCR的实验原理
2025-09-28 来源：网络
