8. 线性

样本经梯度稀释后检测分析即为线性分析，此过程也是用于消除样本的基质效应。基质效应导致的结果有假阴性和假阳性两种，在线性稀释时就可以辨别出来，当存在基质效应时样本的稀释线性就不会满足，说明该类样本有可能不适用ELISA kit，在研发阶段就需要优化反应体系等消除基质效应带来的干扰。

9. 回收率

回收实验可检测试剂盒是否受干扰因子的影响，也是辨别基质效应的一种方法。在研发过程中，一般会采用低、中和高浓度的分析物被掺入到已知浓度的验证样本中，进行回收实验测定，回收率应介于80%-120%，表明试剂盒的性能较好。

10. 稳定性

即试剂盒在有效期内的稳定性。通常采用加速降解的方法来推断试剂盒的有效期。通常试剂盒在37℃放置一天折合有效期2个月，实际工作中，一般将试剂盒在37℃破坏3-7天后，然后检测上述指标，观察是否在范围内。也可留样至有效期后进行检验，来衡量有效期，对于批量大的指标，可将加速降解和留样检验相结合的方法。

另外，ELISA实验操作时质控标准如下：

1、严格按照试剂说明书进行操作。操作前将试剂在室温下平衡30～60min。

2、加样后及时放人孵箱。标本较多时，要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间，防止孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗彻di。

3、封板温育时，各孔一定要封严，防止阳性标本的液体蒸发，产生周边现象从而导致“花板”的出现。

4、用洗板机洗板时，保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后好在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干：还要防止针口有纤维蛋白或异物，这些异物在洗板的过程中易产生拖带现象而导致“花板”的出现。

5、合理安排检测量，以免反应板过多造成洗板等待时间长。

6、加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。

7、显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。

8、加样时保持显色剂不外流;A、B液应避免接触金属器械。加终止液时应避免产生气泡。

9、应保证C清洁，整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸。以上的措施可以使“花板”降至低限度。从而提高检测的特异性。并得到更准确、可靠的实验结果。